T4 DNA Ligase可催化dsDNA平末端或粘性末端相邻核酸的5’磷酸末端和3’羟基末端形成磷酸二酯键，还可催化RNA和双链中的ssDNA或RNA链连接，但不能催化全单链核苷酸连接。适用于标记RNA 3‘-末端，环化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。

 【应用范围】 

1. DNA片段和载体DNA的连接。

2. DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接

【单位定义】 

在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λDNA-HindⅢ的分解物在16℃下反应30分钟时，有50%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

【质量控制】

核酸外切酶残留检测：2000 U的本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

核酸内切酶残留检测：2000 U的本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时，DNA电泳谱带不发生变化。