Enzyme Mix 包含Super M-MLV和Super RNase inhibitor，Super M-MLV是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶，在 50℃下活性最高，且可耐受高达60℃的反应温度，可用于具有二级结构的RNA模板的逆转录。Super M-MLV能够增强与模板的亲和力，可获得更多全长的cDNA，并可检测到低至1 pg的总RNA，特别适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。此外，Super M-MLV的错配率也比M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase有所降低，提高了克隆的保真度。第一链cDNA合成试剂盒包含合成高质量第一链cDNA所需的所有成分。可根据需要，选择Oligo (dT)15、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。

【质量控制】       

所有组分经检测均无核酸外切酶，核酸内切酶，RNase残留。

功能检测1：以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo (dT)18为引物，50℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增DNCH基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的5.6 kb条带。

功能检测2：以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo (dT)18为引物，50℃反应30分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。

【注意事项】

● 所有操作最好在冰上进行。使用无Rnase的离心管、枪头和H2O。

● 对于具有复杂二级结构或高GC含量的模板，可将cDNA第一链合成温度提高至55℃。

● RNA，高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的。

● RT Enzyme Mix已包含RNase inhibitor，用于抵抗环境和体系中可能存在的痕量RNase。

● 5 × RT Buffer-20 ℃冻存溶解后如果有不溶物，请室温或者37℃放置10分钟溶解后混匀使用。

● 第一链cDNA产物可直接用作PCR反应的模板。建议作为模板的cDNA产物的体积不超过PCR反应体积的1/10。