本产品是由Murine RNase inhibitor(Human Placenta)通过突变筛选得到的高效RNase 抑制剂,能够广泛抑制各种RNase (RNase A, B, C)。与RNase inhibitor(Human Placenta)相比,Super RNase inhibitor不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加适合于对高DTT敏感的实验。Super RNase inhibitor经过 RT-PCR、RT-qPCR检验,能与M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。
【浓度及单位定义】
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。RNase A 的活性通过水解Cyclic 2’, 3’-CMP 生成 3’-CMP 定量求得。
【质量控制】
1. 核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3. 大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μl体系中,加入200 U本品,以ddH2O为模板,扩增E. coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
【用途】
1. cDNA第一链合成
2. 多核糖体的分离(Polysome isolation)
3. 体外转录
4. 体外无细胞翻译系统
【注意事项】
1. 抑制RNase活性的pH值范围较广,在 pH 7~8时表现最大活性。
2. 起泡或剧烈搅拌 (Vortex等)会引起失活。
3. 不抑制RNase H活性。