5'/3'-RACE

日期时间：2016-02-24     文章来源：本站     点击量：4768

服务简介

    cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends, RACE）是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是基于PCR技术由已知的一段cDNA片段，通过两端延伸扩增从而获得完整3’和5’端的方法，无需构建cDNA文库，可以短时间内获得目的基因cDNA序列。主要应用于全长基因获取，转录起始位点的位置、转录调控区域、miRNA靶标验证。

 

技术路线

    我们采用clontech和Invitrogen公司RACE技术进行基因3’和5’端序列扩增，保证基因读码框序列完整。

 

         

 

注意事项

1. 提取Total RNA的材料要新鲜，请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂；

2. Total RNA无降解，OD260/280=1.8 - 2.0；

3. 请提供尽量多的实验材料：3′ RACE  Total RNA＞15 μg；5′RACE  Total RNA＞25 μg。如果基因的含量较低或者未知序列较长，样品量需相应增加；

4. 由于mRNA存在个体和组织差异或基因的序列特殊，RACE的PCR产物测序有时会有个别碱基是套峰或测不通的情况，我们最终提供两个质粒的测序结果，碱基的准确性由您自行判断。