【产品概述】
同源重组是一种简单、快速并且高效的DNA定向克隆技术,该方法不受酶切位点限制,可将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物 5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的同源序列 (15 bp~20 bp)。这种两端带有载体末端序列的PCR 产物和线性化克隆载体按一定比例混合后,在重组酶的催化下,仅需37 ℃反应30-60 min即可进行转化,完成定向克隆。
HiFi ClonePG-I是新一代重组酶,适合两个片段的重组,其中添加了独特的重组增强因子,可以显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现高效克隆 (100 cfu/ng Vector),克隆阳性率可达95%以上。2X HiFi ClonePG-I Mix是ClonePG I、反应缓冲液、酶稳定剂的混合物,可以减小操作误差,极大简化实验操作步骤。
【产品优点】
Ø 适用于所有载体进行定向克隆,无需考虑插入片段自身携带的酶切位点
Ø 可高效克隆50 bp~10 kb片段
Ø 克隆阳性率可达95%以上
Ø 线性化克隆载体和PCR产物可不进行纯化直接克隆
【应用范围】
Ø 快速克隆
Ø 高通量克隆
Ø 无缝克隆
Ø DNA定点突变