TRizol是可即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中,TRizol可保持RNA完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物。
加入氯仿后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中。取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。
TRizol试剂可用于小量样品(50-100 mg组织、5×106细胞),也可用于大量样品(≥1 g组织或≥107细胞),对人、动物、植物和细菌组织提取都适用,可同时处理大量不同样品。一个小时内即可完成反应,提取的总RNA没有DNA和蛋白的污染,可用于Northern Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等。
实验材料:Balb/c小鼠肝脏(10mg)。
实验方法:应用ProbeGene公司Trizol和A
公司同类产品按规定操作说明提取RNA。
实验结果:以上为提取样本的总RNA琼脂糖凝胶电泳图。
洗脱体积100ml,上样2ml。
M:TaKaRa DL5,000 DNA Marker;
1、2、3:ProbeGene Trizol提取RNA;
4、5、6:A公司同类产品提取RNA。
琼脂糖凝胶浓度1%,5V/cm电泳15min。